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猪尿中14种β-受体激动剂残留的测定

来源：SCIEX

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注：可以按照客户需求，定制特定品种、特定浓度、特定溶剂的混标。

将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因为考虑对人体会产生副作用，各国开放使用的标准不一。瘦肉精是一类药物，而不是一种特定的物质，是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-受体激动剂的药物，比如在中国造成中毒的克仑特罗（clenbuterol）和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺（Ractopamine）。

瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有健康的肉瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。由于西方国家一般不消费动物内脏（猪肉一般不含瘦肉精，但内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精），因而在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用是合法的。.

引言

β-受体激动剂主要用于治疗人、畜支气管哮喘和支气管痉挛。在用于畜牧饲喂时被非法用于促进动物生长，减少脂肪沉积，提高瘦肉率的作用。人类长期食用含β-受体激动剂残留的食物可能会引起中毒，并对健康造成极大的伤害。目前，我国禁止在使用动物的饲养中使用。由农业部发布的国家标准《猪尿中β-受体激动剂多残留检测液相色谱-串联质谱法（农业部1025号公告-11-2008）》和农业行业标准《动物尿液中11中β-受体激动剂的检测（农业部1063号公告-3-2008）》，对动物尿液中β-受体激动剂液相色谱-质谱/质谱测定方法进行了规定。

本实验依据农业部1025号公告-11-2008和农业部1063号公告-3-2008中的前处理方法，使用液相色谱质谱外标法定量，并进行简单的可行性验证。

样品前处理

准确量取5 mL尿样与50 mL离心管内，加入0.5 mL2 mol/L的乙酸铵缓冲液(pH=5.2），加入40 μL葡萄糖醛苷酶和芳基硫酸酯酶，漩涡混匀，37℃避光水浴震荡16 h。10000 rpm离心10 min，取上清液与另一50 mL离心管内，用5 mol/LNaOH 调节pH值9.8，加入10 mL异丙醇-乙酸乙酯，加入约2 g固体氯化钠，漩涡震荡10 min，5000 rpm离心10 min。以10 mL异丙醇-乙酸乙酯再次提取，合并两次上清液，50℃旋转蒸干，以5 mL 2mol/L乙酸铵溶液溶解，备用。

取备用液过MCX柱以5 mL 5%氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液在50℃下氮气吹干。用1 mL0.2%甲酸水溶液溶解，待测，过0.22 μm滤膜过滤，待测。

液相色谱条件

流动相

A：含5 mM甲酸铵和0.1%甲酸水溶液

B：乙腈

色谱柱

Phenomenex KinetexC18 4.6×100mm 2.6 μm 或相当

柱温

40℃

梯度时间表

质谱条件

TripleQuad™ 6500

新型的IonDrive™专利技术贯穿多组件，以及新设计的高能检测器HED+，提供超宽的定量线性动态范围，无可比拟的定量分析灵敏度，无与伦比的数据准确性和重现性。可与离子淌度差分技术SelexION™匹配，提高选择性。

离子源：具备电喷雾接口的Turbo V™离子源

极性：正离子模式，离子源相关参数如下：

CUR:35.00

TEM:700.00

GS1:60.00

GS2:55.00

IS:5500.00

化合物离子对信息

总结

本方法基于国家标准《猪尿中β-受体激动剂多残留检测液相色谱-串联质谱法（农业部1025号公告-11-2008）》和农业行业标准《动物尿液中11中β-受体激动剂的检测（农业部1063号公告-3-2008）》，使用LC-MS/MS法测定动物源食品中多种β-受体激动剂残留的测定。经验证，适用于SCIEX Triple Quad™ 3500, 3200, 4000系列， 4500系列、API 5000、5500系列以及6500系列的LC-MS/MS系统。方法灵敏度高，重现性好，适用于日常分析。

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